GSTタグ融合発現コールドショックベクター
- 発現条件の至適化なしでも高い可溶化率を実現
- GSTアフィニティー精製、Hisタグ精製、タグ切断が可能
製品説明
pCold GST DNAは、コールドショックベクターをベースとして大阪大学蛋白質研究所の児嶋長次郎准教授により開発された、Schistosoma japonicum由来のグルタチオンSトランスフェラーゼ（GST）を可溶化タグとして利用する発現ベクターです。GSTを目的タンパク質のN末端側に融合発現させることで、融合タンパク質の安定性と可溶性の向上が期待できます。
本ベクターでは、cspAプロモーターの下流に5’非翻訳領域（5’UTR）とtranslation enhancing element（TEE）、Hisタグ、GSTタグ、multi-cloning site（MCS）などが配置されています（下図）。また、プロモーターの下流には発現を厳密に制御するためのlac operatorが挿入されています。
GSTタグ融合タンパク質は親和性の高いアフィニティー精製が可能であり、さらにGSTタグとMCSの間には融合タンパク質からタグを除去するために特異性の高いHRV 3C Proteaseの認識配列が挿入されています。HRV 3C Proteaseは至適温度が4～5℃と低いため、目的タンパク質に対して穏やかな条件でタグ切断反応を行うことができます。
また、pCold GST DNAは大腸菌のプロモーターを用いているため、他のpCold DNAシリーズと同様に、ほとんどの大腸菌株を発現用宿主として利用可能です。
本ベクターでは、cspAプロモーターの下流に5’非翻訳領域（5’UTR）とtranslation enhancing element（TEE）、Hisタグ、GSTタグ、multi-cloning site（MCS）などが配置されています（下図）。また、プロモーターの下流には発現を厳密に制御するためのlac operatorが挿入されています。
GSTタグ融合タンパク質は親和性の高いアフィニティー精製が可能であり、さらにGSTタグとMCSの間には融合タンパク質からタグを除去するために特異性の高いHRV 3C Proteaseの認識配列が挿入されています。HRV 3C Proteaseは至適温度が4～5℃と低いため、目的タンパク質に対して穏やかな条件でタグ切断反応を行うことができます。
また、pCold GST DNAは大腸菌のプロモーターを用いているため、他のpCold DNAシリーズと同様に、ほとんどの大腸菌株を発現用宿主として利用可能です。
保存
－20℃
pCold GST DNAのシーケンスデータ
コールドショック発現ベクター 製品ガイド
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使用文献・参考文献
関連製品・受託
TaKaRa Competent Cells BL21
E. coli HST08 Premium Competent Cells
E. coli JM109 Competent Cells
GSTタグ融合タンパク質精製樹脂
TALON® (Cobalt) レジン
Nickel レジン
HRV 3C Protease
Chaperone Plasmid Set（シャペロンプラスミドセット）
pCold™ベクターシリーズ
pCold™ TF DNA
pCold™ ProS2 DNA
IPTG（dioxane free）（Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside）
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