TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent

アデノ随伴ウイルス産生用トランスフェクション試薬
  • アデノ随伴ウイルス(AAV)、レンチウイルスを高タイターで産生
  • HEK293T細胞培養システム(接着培養および浮遊培養)に対応
  • 幅広い培養スケールで使用可能
transIT-Virusgenチラシ
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
MIR6703

MIR

Mirus Bio社
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
0.3 ml ¥25,000
説明書・データシート・ベクター情報
V6703
MIR6704

MIR

Mirus Bio社
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
0.75 ml ¥60,000
説明書・データシート・ベクター情報
V6704
MIR6700

MIR

Mirus Bio社
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
1.5 ml ¥94,000
説明書・データシート・ベクター情報
V6700
MIR6705

MIR

Mirus Bio社
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
1.5 ml×5 ¥406,000
説明書・データシート・ベクター情報
V6705
MIR6706

MIR

Mirus Bio社
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
1.5 ml×10 ¥740,000
説明書・データシート・ベクター情報
V6706
MIR6710

MIR

Mirus Bio社
TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent Sample
労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
0.1 ml サンプルお申込みはこちら 説明書・データシート・ベクター情報
V6710S
MIR6750

MIR

Mirus Bio社
VirusGEN® AAV Transfection Kit
NEW トランスフェクション試薬 取寄 安全データシート(SDS)添付
1 Kit ¥200,000
¥160,000
2022/07/01~
2022/09/30

説明書・データシート・ベクター情報
V6750
MIR6760

MIR

Mirus Bio社
VirusGEN® LV Transfection Kit
NEW トランスフェクション試薬 取寄 安全データシート(SDS)添付
1 Kit ¥230,000
¥184,000
2022/07/01~
2022/09/30

説明書・データシート・ベクター情報
V6760
MIR6620

MIR

Mirus Bio社
TransduceIT™ Transduction Reagent
取寄
1 ml ¥4,500
説明書・データシート・ベクター情報
V6620
※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。
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製品説明

TransIT-VirusGEN Transfection Reagentは、HEK293Tタイプの細胞へのトランスファーベクターやパッケージングベクターの導入を促進し、アデノ随伴ウイルス(AAV)、およびレンチウイルスの産生能を上げることができるトランスフェクション試薬である。接着培養、浮遊培養のどちらの細胞培養システムでも使用可能である。
VirusGEN AAV Transfection KitおよびVirusGEN LV Transfection KitはTransIT-VirusGEN Transfection Reagentにその導入効率を上昇させる試薬を加えたキットで、AAVベクター、LVベクターの効率的な生産のために最適化されている。
TransduceIT Transduction Reagentは臭化ヘキサジメトリン(hexadimethrine bromide)溶液であり、レンチウイルスによる遺伝子導入効率の向上に汎用的に利用されている。
接着培養、浮遊培養でのAAV産生―トランスフェクション試薬の比較
図1.接着培養、浮遊培養でのAAV産生―トランスフェクション試薬の比較

TransIT-VirusGEN Transfection Reagent(reagent:DNA(vol:wt)=2:1)、A社製品1、A社製品2、25 kDaポリエチレンイミン(PEI)を用いて、浮遊培養したFreeStyle 293-F細胞(FreeStyle F17 Mediumで培養)(A)、または接着培養した293T/17細胞 (B)にpAAV-hrGFP、pAAV-RC、pAAV-Helper (1:1:1 ratio, 1.5 μg/ml, Agilent Technologies)をトランスフェクションした。抽出したウイルスをHT1080細胞に感染させ、48時間後にGFPの発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional titerはGFP陽性細胞が20%未満となるウイルス希釈率より求めた。エラーバーは3ウェルの標準偏差を示す。

接着培養、浮遊培養でのレンチウイルス産生-トランスフェクション試薬の比較
図2.接着培養、浮遊培養でのレンチウイルス産生-トランスフェクション試薬の比較

TransIT-VirusGEN Transfection Reagent(reagent:DNA(vol:wt)=3:1)、A社製品1、A社製品2、25 kDaポリエチレンイミン(PEI)を用いて、浮遊培養したFreeStyle 293-F細胞(FreeStyle F17 Mediumで培養)(A)、または接着培養した293T/17細胞 (B)にpLKO.1-puro-CMV-TurboGFP transfer vector、MISSION Lentivirus Packaging Mix(1:1 ratio, 1 μg/ml)をトランスフェクションした。培養上清を0.45 μmフィルターで濾過後、8 μg/ml TransduceIT存在下で293T/17に感染させ、72時間後にGFPの発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional titerはGFP陽性細胞が20%未満となるウイルス希釈率より求めた。エラーバーは3ウェルの標準偏差を示す。

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AAV産生時の培養スケールの検討
図3.AAV産生時の培養スケールの検討

異なる培養容器、培養液量で浮遊培養したFreeStyle 293-F細胞(FreeStyle F17 Mediumで培養)(A)、または接着培養した293T/17細胞 (B)に、TransIT-VirusGEN Transfection Reagentを用いてpAAV-hrGFP、pAAV-RC、pAAV-Helper (1:1:1 ratio, 1.5 μg/ml, Agilent Technologies)をトランスフェクションした(reagent:DNA(vol:wt)=2:1)。抽出したウイルスをHT1080細胞に感染させ、48時間後にGFPの発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional titerはGFP陽性細胞が20%未満となるウイルス希釈率より求めた。エラーバーは3ウェル/フラスコ/ディッシュの標準偏差を示す。

AAV産生―トランスフェクション試薬の比較(VirusHen AAV Transfection Kit)
図4.AAV産生―トランスフェクション試薬の比較(VirusGEN AAV Transfection Kit)

TransIT-ViruGEN Transfection Reagent 、VirusGEN AAV Transfection Kit、A社製品1、A社製品3を用いて組み換えAAV2の産生能を比較した。Expi293 Expression Media(Thermo Fisher Scientific)で培養したExpi293F cells (Thermo Fisher Scientific)に対して、pAAV-hrGFP, pAAV-RC and pAAV-Helper plasmids(1:1:1 DNA ratio, 2 μg/ml-2 mg per flask, Agilent Technologies)を遺伝子導入し、72時間後、化学的に細胞を溶解してウイルスを回収した。
A.回収したウイルスをHT10180細胞に感染させ、48時間後にGFPの発現を指標にタイターを測定した。また導入されたコピー数についてはCMVプロモーター領域をddPCRで解析して測定した。
B.作製されたウイルスのcapsid数はAAV2 Titration ELISA Kit(Progen)を用いて測定した。また、GC/capsidの比率を計算して算出した。

LV産生―トランスフェクション試薬の比較(VirusHen AAV Transfection Kit)
図5.LV産生―トランスフェクション試薬の比較(VirusGEN LV Transfection Kit)

TransIT-ViruGEN Transfection Reagent、VirusGEN LV Transfection Kit、A社製品3、C社製品1を用いて組み換えLVの産生能を比較した。Expi293 Expression Media (Thermo Fisher Scientific) で培養したExpi293F cells(Thermo Fisher Scientific)に対して、2組のプラスミドセット(A. pALD-LentiEGFP-A transfer vector、pALD-VSV-G-A、pALD-Rev-Aと pALD-GagPol-A packaging vectors(DNA比率3:0.5:0.5:2 , Aldevron)、B. pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP transfer vector(MilliporeSigma)、ViraSafe Pantropic Packaging mix(pRSV-Rev, pCMV-VSV-G, pCgpV, CellBio Lab)、DNA比率3:0.5:0.5:2 )を遺伝子導入し、ウイルスを回収した。
回収したウイルスを293T/17細胞に感染させ、72時間後にGFPの発現を指標にタイターを測定した。

保存

-20℃
VirusGEN AAV Complex Formation Solution and Enhancer、VirusGEN LV Enhancer、VirusGEN LV Complex Formation Solution 2~10℃保存

トランスフェクション試薬選択 オンラインツール

◆選択ガイド

実験目的別に、各標的細胞に最適な遺伝子導入試薬(Mirus社製品)をまとめました。
効率的な試薬の選択にご活用ください。
▶ 遺伝子導入試薬 選択ガイド(Mirus社)

◆検索ツール

“Reagent Agent”は、Mirus社が提供するトランスフェクション試薬の検索ツールです。
細胞と導入する核酸の種類から、推奨されるトランスフェクション試薬を検索することができます。

試薬の見本
注意事項
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