幅広いターゲットに対応可能なqPCR（リアルタイムPCR）用スタンダード試薬
- 幅広いターゲットに対応するリアルタイムPCRのスタンダード試薬
- 増幅効率と反応特異性のバランスが良く非常に使いやすい
- 耐熱性RNase Hもプレミックス化することで定量性がさらにアップ
- Perfect Real TimeサポートシステムのRT-PCR用プライマーには本試薬が第一推奨
製品説明
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)は、インターカレーター法によるリアルタイムPCR専用試薬である。2×濃度のプレミックスタイプ試薬で、リアルタイムモニタリングに適した濃度のインターカレーターTB Greenをあらかじめ含んでおり、反応液の調製が簡単である。また、耐熱性RNase HであるTli RNaseHをあらかじめ2×プレミックス試薬中に添加しており、cDNAを鋳型とした場合の残存mRNAによるPCR反応阻害を極限まで抑制できる。
本製品は、幅広いターゲットに対応できるスタンダード試薬である。バッファー組成の改変によりTB Green Premix Ex Taq（Tli RNaseH Plus）（製品コード RR420S/A/B）に比べ反応特異性を高めている。定量の妨げとなる非特異的増幅を抑制し、幅広い濃度範囲でより正確な定量が可能である。このバッファーと抗Taq抗体を利用したホットスタートPCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSとの組み合わせにより、再現性よく信頼性の高いリアルタイムPCR解析を実現できる。
本製品を2ステップリアルタイムRT-PCRに使用する場合には、リアルタイムRT-PCR専用の逆転写試薬キットであるPrimeScript RTキットシリーズ（製品コード RR037A/B、RR036A/B、RR047A/B）との組み合わせを推奨する。Perfect Real TimeサポートシステムのリアルタイムRT-PCR用プライマーを用いる場合には、本試薬の使用を第一に推奨する。
本製品の適応機種
- Thermal Cycler Dice Real Time System III（製品コード TP950/TP970/TP980/TP990）
- Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
- Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
- CronoSTAR 96 Real-Time PCR System（製品コード 640231/640232）
- Applied Biosystems 7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR System、StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
- LightCycler、LightCycler 480 System（Roche Diagnostics社）
- CFX96 Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社） など
（注）Smart Cycler System/Smart Cycler II System（Cepheid社）には、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR420S/A/B）の使用を推奨します。
★製品コード RR420とRR820、RR091の使い分け
大容量包装品もございます。詳しくはこちらをご覧ください。
内容
RR820S（40回反応分）
RR820A（200回反応分）
| TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（2×conc.）＊1 | 1 ml |
| ROX Reference Dye（50×conc.）＊2 | 40 μl |
| ROX Reference Dye II（50×conc.）＊2 | 40 μl |
RR820A（200回反応分）
| TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（2×conc.）＊1 | 1 ml×5本 |
| ROX Reference Dye（50×conc.）＊2 | 200 μl |
| ROX Reference Dye II（50×conc.）＊2 | 200 μl |
*1 TaKaRa Ex Taq HS、dNTP Mixture、Mg2＋、Tli RNaseHおよびTB Greenを含む。
*2 Applied BiosystemsのリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用します。
- ROX Reference Dyeを添加する機種
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） - ROX Reference Dye II を添加する機種
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） - 添加の必要がない機種
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ（製品コード TP700/TP900：終売、TP950など）
CronoSTAR 96 Real-Time PCR System（製品コード 640231/640232）
LightCycler/LightCycler 480 システム（Roche Diagnostics社）
CFX96 Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社）
保存
4℃保存：6ヵ月安定
※必ず遮光してください。また、コンタミネーションには十分注意してください。
長期保存する場合は－20℃で保存してください。
いったん融解したものは4℃で保存し、6ヵ月をめどにご使用ください。
※必ず遮光してください。また、コンタミネーションには十分注意してください。
長期保存する場合は－20℃で保存してください。
いったん融解したものは4℃で保存し、6ヵ月をめどにご使用ください。
特長
- リアルタイムPCRにより、遺伝子の検出、定量を迅速かつ正確に行うことが可能です。
- TB Greenがあらかじめミックスしてある2×conc.のプレミックス試薬です。プライマーとテンプレートと滅菌精製水を加えるだけでインターカレーター法によるリアルタイムPCRを行うことができます。
- PCRには、ホットスタートPCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSを用いています。バッファー系はリアルタイムPCR用に至適化されているため、増幅効率が良く、高感度な検出ができます。
- 2×プレミックス試薬中に、耐熱性RNase HであるTli RNaseHをあらかじめ添加しています。cDNAを鋳型とした場合の、残存mRNAによるPCR反応阻害を極限まで抑制します。
リアルタイムRT-PCR用プライマーを作製します 「Perfect Real Time サポートシステム」
Perfect Real Timeサポートシステム for インターカレーターは、インターカレーター法（TB Green検出）によるリアルタイムRT-PCR用に最適化されたプライマーを検索・オンライン注文するためのシステムです。
ヒト、マウス、ラット、ウシ、イヌ、ニワトリ、イネ、シロイヌナズナのRefSeq登録遺伝子またはEnsembl Plants登録遺伝子に対して網羅的にリアルタイムRT-PCR用のプライマーを設計しています。
ターゲット遺伝子を検索し、ご希望のプライマーセットを選択すれば簡単にオンラインで注文できます。わずらわしいプライマー設計と反応条件の至適化作業はもう不要です。siRNAの効果の確認、DNAマイクロアレイ解析結果の検証など遺伝子発現定量や遺伝子検出にどうぞお気軽にご利用ください。
サポートシステムはこちら
* プライマーによっては1ステップの系では十分に性能を発揮できない場合がありますが、その場合にはTB Green Premix Ex Taq II（Tli RNaseH Plus）（製品コード RR820S/A/B）または TB Green Premix Ex Taq（Tli RNaseH Plus）（製品コード RR420S/A/B）等を用いる2ステップRT-PCRでお試しください。
ヒト、マウス、ラット、ウシ、イヌ、ニワトリ、イネ、シロイヌナズナのRefSeq登録遺伝子またはEnsembl Plants登録遺伝子に対して網羅的にリアルタイムRT-PCR用のプライマーを設計しています。
ターゲット遺伝子を検索し、ご希望のプライマーセットを選択すれば簡単にオンラインで注文できます。わずらわしいプライマー設計と反応条件の至適化作業はもう不要です。siRNAの効果の確認、DNAマイクロアレイ解析結果の検証など遺伝子発現定量や遺伝子検出にどうぞお気軽にご利用ください。
サポートシステムはこちら
* プライマーによっては1ステップの系では十分に性能を発揮できない場合がありますが、その場合にはTB Green Premix Ex Taq II（Tli RNaseH Plus）（製品コード RR820S/A/B）または TB Green Premix Ex Taq（Tli RNaseH Plus）（製品コード RR420S/A/B）等を用いる2ステップRT-PCRでお試しください。
リアルタイムPCR関連実験の各種手法をホームページでご紹介しています。あわせてご参照ください。
Protocols
Thermal Cycler Dice® Real Time System IIを用いる場合の操作方法（Perfect Real Time サポートシステム（PRTSS）のプライマーを使用する場合）
Thermal Cycler Dice® Real Time System IIを用いる場合の操作方法（自作のプライマーなどPRTSS 以外のプライマーを使用する場合）
Applied Biosystems 7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR SystemおよびStepOnePlus™ Real-Time PCR Systemを用いる場合の操作方法
LightCycler®を用いる場合の操作方法
実験条件の選び方
Application
【ユーザー様実施例1】 他社qPCR用酵素との検量線比較
【ユーザー様実施例2】 炎症マーカーの発現確認
【ユーザー様実施例3】 オウトウショウジョウバエの生殖休眠誘導機構に時計遺伝子は介在するか？
【ユーザー様実施例4】 マイコプラズマ感染細胞の細胞とマイコプラズマのDNAコピー数の推移
【ユーザー様実施例5】 PPAR-γ活性化による脂肪細胞分化誘導に及ぼす化合物併用の影響
【ユーザー様実施例6】 c-fosのスタンダードサンプル作製
使用文献・参考文献
関連製品・受託
TB Green® Fast qPCR Mix
TB Green® Premix Ex Taq™ (Tli RNaseH Plus)
TB Green® Premix DimerEraser™ (Perfect Real Time)
TB Green® Premix Ex Taq™ GC (Perfect Real Time)
TB Green®検出系qPCR試薬 大容量包装品
TB Green®検出系 qPCR試薬 大容量包装品
（ROX Reference Dyeプレミックスタイプ）
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
PrimeScript™ II 1st strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
One Step TB Green® PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
One Step TB Green® PrimeScript™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)
One Step TB Green® PrimeScript™ PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
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TB Green Premixシリーズの使い分けについて
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TB Green® Premix DimerEraser™ (Perfect Real Time)
手強いプライマーダイマーや非特異的増幅にお困りなら
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PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
ゲノムDNA除去反応をプラス
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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