Chaperone Plasmid Set（シャペロンプラスミドセット）

組換えタンパク質の可溶化発現に
製品コード メーカー
略称		 製品名 容量 価格（税別） 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報		 参考資料 カート
Takara Code
3340

TKR

タカラバイオ（株）
 Chaperone Plasmid Set
1 Kit ￥33,000
 説明書・データシート・ベクター情報 個
3340
カートにいれる

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製品説明

大腸菌で異種タンパク質を発現させた場合、発現タンパク質が封入体（inclusion body）を形成したり、プロテアーゼによる分解を受けたりするケースがしばしば見られる。これは、発現タンパク質が正しく折りたたまれないことが原因である場合が多く、タンパク質機能研究の大きな障害となっている。
タンパク質の折りたたみには、それを介助する分子シャペロンの存在が知られており、in vitroでのタンパク質の折り畳みの機序を解明するため、多くの研究がなされている。
本セットに含まれる5種類のプラスミドは株式会社 HSP研究所で開発されたものであり、タンパク質の折りたたみに共同して働いていることが知られている複数の分子シャペロンが、それぞれひとつのプラスミド上にコードされ、シャペロンチームとして効率よく発現するよう設計されている。
これらのシャペロンチームのいずれかと、目的タンパク質を共発現することにより、従来封入体を形成していたタンパク質の可溶性画分への回収効率を高めることができる。

内容

プラスミド濃度液量シャペロンプロモーター インデューサー薬剤マーカー
pG-KJE810 ng/μl 100 μl dnaK-dnaJ-grpE
groES-groEL		 araB
Pzt1		 L-Arabinose
Tetracyclin		Cm
pGro710 ng/μl 100 μl groES-groEL araB L-ArabinoseCm
pKJE710 ng/μl 100 μl dnaK-dnaJ-grpE araB L-ArabinoseCm
pG-Tf210 ng/μl 100 μl groES-groEL-tig Pzt1 TetracyclinCm
pTf1610 ng/μl 100 μl tig araB L-ArabinoseCm

保存

－20℃

備考

1. 本シャペロンプラスミドはpACYCの複製起点およびクロラムフェニコール耐性遺伝子（Cmr遺伝子）を利用している。汎用されているColEIタイプのアンピシリン耐性遺伝子をマーカーとした大腸菌発現系には共存させて使用できるが、Cmr遺伝子を含むプラスミドや、クロラムフェニコール耐性を示す大腸菌宿主との組み合わせでは利用できない。例えば、pET システムなどで用いられる E. coli BL21（DE3）は宿主として使用できるが、Cmr遺伝子が挿入され、pACYCの複製起点を持つpLysSを保持する E. coli BL21（DE3）pLysSは利用できない。

2. 本製品では、目的タンパク質とシャペロンとの共発現系を構築するため、まずシャペロンプラスミドで形質転換した大腸菌を作製し、その後、目的タンパク質の発現プラスミドで形質転換する2段階の方法を推奨している。
Chaperone Competent Cells BL21シリーズが利用できる。したがって、シャペロンプラスミドで形質転換した大腸菌から、コンピテントセルを調製する必要がある。

DNAのシーケンスデータ

2020年12月9日に配列情報を修正しました。

使用上の注意

Chaperone Plasmidおよびその関連製品は、研究目的のみの使用に限定しています。スクリーニングや生産など商用目的での使用にあたっては、ライセンス付のベクター製品をご購入ください。この製品については営業推進部までお問い合わせください。
タカラバイオ（株）　　営業推進部
TEL：077-565-6972　　FAX：077-565-6987

Chaperone Plasmid pG-KJE8, pGro7, pKJE7, pTf16にはSalmonella typhimurium由来のaraBプロモーターおよびaraC遺伝子が含まれます。これらのプラスミドで大腸菌を形質転換すると、「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」の遺伝子組換え生物等に該当します。ご使用の際は、「研究開発等に係る遺伝子組換え生物等の第二種使用等に当たって執るべき拡散防止措置を定める省令」（平成16年文科省・環境省令第1号）および組織内の安全委員会の指示に従って行ってください。

コールドショック発現ベクター　製品ガイド

下記よりPDFでご覧いただけます。
印刷物はこちらからご請求ください。（資料請求フォームへ）

Protocols

Chaperone Plasmid Set

Application

pCold™ I DNAとpG-Tf2との共発現による目的タンパク質の発現（可溶化促進例、発現・可溶化の成功例）

BIO VIEW / Clontechniques

コールドショック発現系とシャペロンプラスミドの併用効果

使用文献・参考文献

関連製品・受託

Chaperone Competent Cells BL21シリーズ
TaKaRa Competent Cells BL21
pCold™ベクターシリーズ
pCold™ TF DNA
pCold™ GST DNA
pCold™ ProS2 DNA
In-Fusion® HD Cloning Kit
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
TaKaRa DNA Ligation Kit LONG
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase
E. coli HST08 Premium Competent Cells
Protein Molecular Weight Marker
TALON® (Cobalt) レジン

Chaperone Competent Cells BL21/Chaperone Plasmid Set

注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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