E. coli HST16CR Competent Cells

pUC系プラスミドのコピー数を低く維持！高効率コンピテントセル
SOC培地添付
製品コード メーカー
略称		 製品名 容量 価格（税別） 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報		 参考資料 カート
Takara Code
9131

TKR

タカラバイオ（株）
 E. coli HST16CR Competent Cells
労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
10 transformations ￥47,000
 説明書・データシート・ベクター情報 個
9131
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特長

  • pcnB遺伝子の欠損で、本株中ではpUC系プラスミドのコピー数が減少
  • 高コピーベクターでは難しかった、大腸菌生育阻害のかかる遺伝子のクローニングにおススメ
    ※実験例を「技術情報」に掲載しています。ぜひご覧ください！

製品説明

E. coli HST16CR Competent Cellsは高効率コンピテントセルとして実績のあるE. coli HST08 Premium Competent Cellsをベースに、ColE1 oriの複製に関係する遺伝子pcnBを欠損させた株である。pcnBの欠損により、pUC系ベクターで形質転換を行った場合にベクターのコピー数が低くなるため、高コピーベクターではクローニングが難しい膜貫通ドメインを持つタンパク質等、大腸菌の生育を阻害する遺伝子のクローニングに有効である。
E. coli HST08 Premium Competent Cellsをベースにしているため、外来のメチル化DNAを切断する遺伝子群（mrr-mcrBC-hsdRMS）、mcrAを欠失しており、メチル化されたDNAのクローニングも可能である。
また、pUC系プラスミドでの形質転換の際には、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用し、X-Gal添加による青白選択を行うことができ、容易に組換え体を選別できる。
※ X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside

内容

E. coli HST16CR Competent Cells100 μl×10本
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium＊1 ml×10本
* SOC Mediumの組成 ：
2％Tryptone
0.5％Yeast extract
10 mMNaCl
2.5 mMKCl
10 mMMgSO4
10 mMMgCl2
20 mMGlucose
【ご注意】
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。

保存

－80℃

品質

形質転換効率
プラスミドベクターを用いて形質転換する場合の方法により1 ngのpUC19プラスミドで形質転換し、Amp+のプレートでコロニーを選別した。
このとき、＞ 1×108 colonies/μg・pUC19プラスミドDNAの効率を得た。

β-ガラクトシダーゼのα-相補性の確認
pUC19プラスミドを用いて形質転換を行い、100 μg/mlのアンピシリン、60 μg/ml X-Galを含むL-寒天培地にプレートした場合、青色のコロニーが出現することを確認している。

Genotype

F－, endA1, supE44, thi-1, recA1, relA1, gyrA96, phoA, Φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF)U169, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC), ΔmcrA, ΔpcnB, λ－
（K-12株由来大腸菌）

Cell density

1～2×109 bacteria/ml

プラスミドスクリーニングに使用する抗生物質と選択濃度

抗生物質アンピシリンカナマイシンクロラムフェニコールストレプトマイシンテトラサイクリン
濃度（μg/ml）1005020NANA

Application

コンピテントセルHST16CR株を使用した実験例

遺伝子操作でよく利用される大腸菌（K-12由来株）の遺伝子型
製品選択ガイド（コンピテントセル・エレクトロセル）

使用文献・参考文献

関連製品・受託

DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
TaKaRa DNA Ligation Kit LONG
E. coli HST08 Premium Competent Cells
E. coli HST08 Premium Electro-Cells
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大腸菌コンピテントセルの基本

注意事項
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