製品説明
PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP gradeは、Capアナログ依存的RNA合成、低dsRNA生成、および耐熱性(~52℃)の特長を併せ持つ、T7 RNA polymerase
*1の改変体です。本酵素とCleanCap Reagent AG(TriLink社)などCapアナログ、10X IVT Reaction Buffer GMP grade(製品コード T2401S010ほか・別売)を使用した
in vitro transcription(IVT)では、免疫原性のあるdsRNAの生成を大幅に低減しつつ、高いCap付加効率で高品質なmRNAを大量に調製できます。
*1 T7 promoter配列を含む二本鎖DNAを鋳型、NTPを基質として、プロモーター下流の領域を転写し、
in vitroで一本鎖RNAを合成する酵素
反応例FLuc mRNAでの合成収量およびdsRNA生成の抑制効果(PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA)(製品コード 2560A))
詳細はこちら

用途
- Capアナログを使用したcapped mRNAの合成(共転写キャッピング)
- 酵素的キャッピングに使用するmRNAの合成
※RNA収量はCapアナログ使用時と比べ、5~30%減少する場合があります。
商用生産用途での利用に際し、供給等に関わる契約を検討されている場合、別途ご相談ください。
お問い合わせはこちら 品質
- 本製品は、GMPに関する各種ガイドライン(ICH Q7、PIC/S GMP)を参照した管理基準に沿って、製造および品質管理されています。詳細はこちら
品質グレードとは?(RUO/HQ/GMP)
- 本製品はヒトまたは動物由来原料を含んでおりません。
- 本製品はβ-ラクタム系化合物不使用の一次原料を採用しています。
品質保証文書の提供
Certificate of Origin (CoO)、Statement of compliance (SOC)、β-ラクタム系化合物不使用等の証明を発行します。発行のご希望や証明書の種類に関するご要望については、別途ご相談ください。
内容
■酵素
PrimeCap T7 RNA Polymerase GMP grade(製品コード T2422S001) 200 KU
■バッファー
10X IVT Reaction Buffer GMP grade(製品コード T2401S010) 10 ml
※本GMP grade製品では、酵素およびバッファーは個別に販売され、酵素・バッファーのセット品はございませんのでご注意ください。
保存
-20℃±5℃
有効期限
CoAおよび製品ラベルをご覧ください。(詳細はお問い合わせください。)
濃度
200 U/μl
起源
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase variant
一般的性質
質量:約99.8 kDa
補因子:Mg2+
活性の定義
37℃において1時間に0.25 μgの1.9 kb FLuc RNAを生成する酵素量を1 Uとする。
活性測定用反応液組成
1X IVT Reaction Buffer GMP grade
10 mM ATP・CTP・GTP・UTP
0.9 μg/20 μl リニア化 FLuc プラスミド DNA
品質管理データ
性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis(CoA)をご覧ください。CoAは
こちらからダウンロードできます。
注意事項
- 本酵素の激しい攪拌は行わないでください。
- RNaseが混入しないように注意してください。RNaseが混入した場合、反応後に得られるRNAの収量が低下したり、RNAが断片化したりする場合があります。
- 均一な長さのRNAを合成するために、T7 promoterを含む線状化したプラスミドあるいはPCR産物などが鋳型DNAとして使用できます。線状化鋳型の3’末端は5’突出あるいは平滑末端が望ましいとされています。
- 10X IVT Reaction Buffer GMP gradeにはスペルミジンが含まれています。スペルミジンは核酸と複合体を形成して、場合によっては不溶物質として沈殿する可能性がありますので、鋳型DNAは必ず酵素以外のコンポーネントの最後に加えるようにしてください。
使用例(約1.9 kbのRNA合成)
37℃で1~2時間インキュベーションする。
*1 修飾NTPを使用する場合は、対応するNTPを等量で置き換える。
*2 CleanCap Reagent AG (3’ OMe)(TriLink社 Code. N-7413-1/5/10等)