PrimeCap® T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade

dsRNAの大幅な低減と高いキャッピング効率を実現するT7 RNA Polymerase改変体【GMP grade製品】
  • PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA)（製品コード 2560A）のGMP grade製品
  • GMPに関する各種ガイドライン（ICH Q7、PIC/S GMP）を参照した管理基準に沿って製造管理および品質管理
  • ヒトまたは動物由来原料、およびβ-ラクタム系化合物を不使用
  • in vitro transcription（IVT）でのRNA合成時に、dsRNA生成を大幅に抑制し、生体投与時の免疫原性を低減
  • CleanCap Reagent AGなどのCapアナログと組み合わせることで、効率的なキャッピングと高いRNA収量を実現

? 品質グレードとは？（RUO/HQ/GMP）
製品コード メーカー
略称		 製品名 容量 価格（税別） 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報		 参考資料 カート
Takara Code
T2422S001

TKR

タカラバイオ（株）
 PrimeCap® T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade
安全データシート（SDS）添付 ライセンス
200 KU 専用発注書にてお申し込みください。
★ 価格・納期はお問い合わせください。 		説明書・データシート・ベクター情報 個
T2422S001
T2422S010

TKR

タカラバイオ（株）
 PrimeCap® T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade
安全データシート（SDS）添付 ライセンス
2,000 KU 専用発注書にてお申し込みください。
★ 価格・納期はお問い合わせください。 		説明書・データシート・ベクター情報 個
T2422S010
T2422S100

TKR

タカラバイオ（株）
 PrimeCap® T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade
取寄 安全データシート（SDS）添付 ライセンス
20,000 KU 専用発注書にてお申し込みください。
★ 価格・納期はお問い合わせください。 		説明書・データシート・ベクター情報 個
T2422S100
T2401S010

TKR

タカラバイオ（株）
 10X IVT Reaction Buffer GMP grade
安全データシート（SDS）添付
10 ml 専用発注書にてお申し込みください。
★ 価格・納期はお問い合わせください。 		説明書・データシート・ベクター情報 個
T2401S010
T2401S100

TKR

タカラバイオ（株）
 10X IVT Reaction Buffer GMP grade
取寄 安全データシート（SDS）添付
100 ml 専用発注書にてお申し込みください。
★ 価格・納期はお問い合わせください。 		説明書・データシート・ベクター情報 個
T2401S100
T2401S500

TKR

タカラバイオ（株）
 10X IVT Reaction Buffer GMP grade
取寄 安全データシート（SDS）添付
500 ml 専用発注書にてお申し込みください。
★ 価格・納期はお問い合わせください。 		説明書・データシート・ベクター情報 個
T2401S500
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製品説明

PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP gradeは、Capアナログ依存的RNA合成、低dsRNA生成、および耐熱性（～52℃）の特長を併せ持つ、T7 RNA polymerase＊1の改変体です。本酵素とCleanCap Reagent AG（TriLink社）などCapアナログ、10X IVT Reaction Buffer GMP grade（製品コード T2401S010ほか・別売）を使用したin vitro transcription（IVT）では、免疫原性のあるdsRNAの生成を大幅に低減しつつ、高いCap付加効率で高品質なmRNAを大量に調製できます。

＊1 T7 promoter配列を含む二本鎖DNAを鋳型、NTPを基質として、プロモーター下流の領域を転写し、in vitroで一本鎖RNAを合成する酵素

反応例
FLuc mRNAでの合成収量およびdsRNA生成の抑制効果（PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA)（製品コード 2560A））詳細はこちら
FLuc mRNA（約1.9 kb）での合成収量（左図）およびdsRNA生成の抑制効果（右図）

用途

  1. Capアナログを使用したcapped mRNAの合成（共転写キャッピング）
  2. 酵素的キャッピングに使用するmRNAの合成
    ※RNA収量はCapアナログ使用時と比べ、5～30％減少する場合があります。
商用生産用途での利用に際し、供給等に関わる契約を検討されている場合、別途ご相談ください。お問い合わせはこちら

品質

  1. 本製品は、GMPに関する各種ガイドライン（ICH Q7、PIC/S GMP）を参照した管理基準に沿って、製造および品質管理されています。詳細はこちら　? 品質グレードとは？（RUO/HQ/GMP）
  2. 本製品はヒトまたは動物由来原料を含んでおりません。
  3. 本製品はβ-ラクタム系化合物不使用の一次原料を採用しています。

品質保証文書の提供

Certificate of Origin (CoO)、Statement of compliance (SOC)、β-ラクタム系化合物不使用等の証明を発行します。発行のご希望や証明書の種類に関するご要望については、別途ご相談ください。

内容

■酵素
PrimeCap T7 RNA Polymerase GMP grade（製品コード T2422S001）　200 KU

■バッファー
10X IVT Reaction Buffer GMP grade（製品コード T2401S010）　10 ml

※本GMP grade製品では、酵素およびバッファーは個別に販売され、酵素・バッファーのセット品はございませんのでご注意ください。

濃度

200 U/μl

保存

－20℃±5℃

有効期限

CoAおよび製品ラベルをご覧ください。（詳細はお問い合わせください。）

起源

Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase variant

一般的性質

質量：約99.8 kDa
補因子：Mg2＋

活性の定義

37℃において1時間に0.25 μgの1.9 kb FLuc RNAを生成する酵素量を1 Uとする。

活性測定用反応液組成

1X IVT Reaction Buffer GMP grade
10 mM ATP・CTP・GTP・UTP
0.9 μg/20 μl リニア化 FLuc プラスミド DNA

品質管理データ

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはこちらからダウンロードできます。

注意事項

  1. 本酵素の激しい攪拌は行わないでください。
  2. RNaseが混入しないように注意してください。RNaseが混入した場合、反応後に得られるRNAの収量が低下したり、RNAが断片化したりする場合があります。
  3. 均一な長さのRNAを合成するために、T7 promoterを含む線状化したプラスミドあるいはPCR産物などが鋳型DNAとして使用できます。線状化鋳型の3’末端は5’突出あるいは平滑末端が望ましいとされています。
  4. 10X IVT Reaction Buffer GMP gradeにはスペルミジンが含まれています。スペルミジンは核酸と複合体を形成して、場合によっては不溶物質として沈殿する可能性がありますので、鋳型DNAは必ず酵素以外のコンポーネントの最後に加えるようにしてください。

使用例（約1.9 kbのRNA合成）

横にスクロールできます
滅菌精製水X μl
10X IVT Reaction Buffer GMP grade2 μl
ATP、CTP、GTP、UTP＊1各 10 mM
CleanCap Reagent AG (3’ OMe) ＊24 mM
Template DNA0.5～2 μg
RNase Inhibitor20 U
Pyrophosphatase (inorganic)0.1 U
PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade200 U
Total20 μl

37℃で1～2時間インキュベーションする。

＊1 修飾NTPを使用する場合は、対応するNTPを等量で置き換える。
＊2 CleanCap Reagent AG (3’ OMe)（TriLink社 Code. N-7413-1/5/10等）

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注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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