Takara Stable Competent Cells

Poly(A)やリピート配列を含む不安定な遺伝子のクローニングに適したコンピテントセル

製品コード	メーカー略称	製品名	容量	価格（税別）	特記事項	説明書、CoA データシートベクター情報	参考資料	カート
Takara Code	メーカー略称	製品名	容量	価格（税別）	特記事項	説明書、CoA データシートベクター情報	参考資料	カート
9132	TKR タカラバイオ（株）	Takara Stable Competent Cells	10 transformations	￥31,000				個
9132	TKR タカラバイオ（株）	Takara Stable Competent Cells	10 transformations	￥31,000				個

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製品説明

本コンピテントセルは、DNAの安定性が向上するように相同組換えに関連する遺伝子の一部が破壊されているため、poly(A)配列やリピート配列などを含む不安定なDNAのクローニングに適しています。また、本製品はT1バクテリオファージの感染に必要なfhuA遺伝子を欠損させてあるため、本ファージに対して耐性があります。

クローニングの際には、In-Fusion Snap Assembly Master Mix （Cat. 638943/638944/638947～638949）の使用を推奨します。pUC系ベクターでの形質転換の際には、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用し、X-Gal^*の分解によるコロニーの青白選択が可能です。
＊5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside

Competent Cells

Poly(A) length [bp]

Poly(A) full length ratio

E. coli JM109
Competent Cells

105	105	43	66	105	44	105	22	27	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	32	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	48	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	105	46	105	45	105

81.25％
(39/48)

Takara Stable
Competent Cells

105	105	105	65	105	105	105	105	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	105	105	105	105	105
105	105	22	105	105	105	105	105	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	66	105	105	105	105	105

93.75％
(45/48)

図1. Poly(A)安定性の比較
105 bpのpoly(A)をコードするプラスミドDNAをE. coli JM109 Competent Cells（製品コード 9052）およびTakara Stable Competent Cells（製品コード 9132）に形質転換し、LBプレートで培養後48個のコロニーからプラスミドを抽出した。抽出したプラスミドをそれぞれサンガーシーケンスし、poly(A)長を測定した。Poly(A)の脱落が起こり105 bpより短くなっていたpoly(A)長を赤字で示している。
48個のプラスミドのうち、JM109ではpoly(A)完全長を有するプラスミドが39個得られたのに対し（Poly(A) full length ratio: 39/48＝81.25％）、Takara Stable Competent Cellsでは45個得られた（Poly(A) full length ratio: 45/48＝93.75％）。
この結果より、Takara Stable Competent CellsではJM109に比べてPoly(A)の脱落頻度が低減されていることが示された。

その他アプリケーションデータ（Poly(A)安定性・反復配列安定性の比較）はこちら

内容

Takara Stable Competent Cells	100 μl×10本
pUC19 DNA (0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml×10本

＊SOC Mediumの組成
2％	Tryptone
0.5％	Yeast extract
10 mM	NaCl
2.5 mM	KCl
10 mM	MgSO₄
10 mM	MgCl₂
20 mM	Glucose

【ご注意】
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。

保存

－80℃

Genotype

F^－, endA1, supE44, thi-1, recA1, relA1, gyrA96, phoA, ΔsbcCD, Φ80d lacZΔM15, ΔfhuA, Δ(lacZYA - argF) U169, Δ(mrr - hsdRMS - mcrBC), ΔmcrA, λ^－
（K-12株由来大腸菌）

Cell density

1～2×10⁹ bacteria/ml

プラスミドスクリーニングに使用する抗生物質と選択濃度

抗生物質	アンピシリン	カナマイシン	クロラムフェニコール	ストレプトマイシン	テトラサイクリン
濃度（μg/ml）	100	50	20	50	20

技術情報

Application

Poly(A)安定性・反復配列安定性の比較

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