T7 RNA Polymerase, HQ

RNA医薬・ワクチン製造工程のプロセス開発時等に利用可能なHigh Quality（HQ）品

T7 RNA Polymerase ver.2.0（製品コード 2541A）と同等の高いRNA収量
ヒトまたは動物由来成分、およびβラクタム系化合物を最終組成液に含まない「High Quality（HQ）グレード製品」
RNA医薬開発等の基礎研究段階での利用に加え、非臨床試験や医薬品原料のGMP製造前のプロセス開発段階での利用に適しています。

品質グレードとは？（RUO/HQ/GMP）

パンフレットは
こちら

製品コード	メーカー略称	製品名	容量	価格（税別）	特記事項	説明書、CoA データシートベクター情報	参考資料	カート
Takara Code	メーカー略称	製品名	容量	価格（税別）	特記事項	説明書、CoA データシートベクター情報	参考資料	カート
2542A	TKR タカラバイオ（株）	T7 RNA Polymerase, HQ	200,000 U		2541Aと同等性能のHQグレード品 ★価格はお問い合わせください			個
2542A	TKR タカラバイオ（株）	T7 RNA Polymerase, HQ	200,000 U		2541Aと同等性能のHQグレード品 ★価格はお問い合わせください			個

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製品説明

T7 RNA Polymerase, HQは、ヒトまたは動物由来原料およびβラクタム系化合物を最終組成液に含まないHigh Quality（HQ）グレード試薬（研究用）です。本製品は、非臨床試験用の医薬品原薬の調製やGMPガイドラインに準拠する医薬品の製造プロセスの開発、また、RNA 医薬開発等の基礎研究に利用可能な製品です。

品質グレードとは？（RUO/HQ/GMP）

本酵素は、T7 promoter配列を含む二本鎖DNAを鋳型、NTPを基質として、プロモーター下流の領域を転写し、一本鎖RNAを合成します。
従来製品（RUOグレード）のT7 RNA Polymerase ver.2.0（製品コード 2541A）と同等の性能を有しており、添付の反応バッファーと組み合わせてin vitro transcription（IVT）反応に用いることで、高品質かつ大量のRNAが調製できます。

図1．RNA合成収量（RUOおよび他社品との比較）
CleanCap Reagent AG（TriLink社）を使用してFLuc RNAを合成した際の収量比較（200 μl反応系）
本製品およびT7 RNA Polymerase ver.2.0（製品コード 2541A）では高いRNA収量を示す。
T7 RNA Polymerase ver.2.0のRNA合成収量については製品ページをご参照ください。
使用例（20 μl反応系）はこちら

用途

＜医薬品原料開発＞
非臨床試験用mRNA原薬の調製
RNA医薬のプロセス開発

＜基礎研究＞
Cap analogを用いたcapped mRNAの合成
Long non-coding RNAの合成
guide RNAの合成
siRNA前駆体の合成
RT-qPCR用RNA標準鋳型の合成
高標識RNAプローブの合成

品質

本製品の最終組成液には、ヒトまたは動物由来成分、およびβラクタム系化合物は含まれません。

内容

T7 RNA Polymerase, HQ (200 U/μl)	200,000 U
10×IVT Reaction Buffer, HQ	10 ml

保存

－20℃

濃度

200 U/μl

起源

Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase

一般的性質

質量：約99.8 kDa
補因子：Mg²⁺

活性の定義

37℃において1時間に0.5 μgの1.9 kb FLuc RNAを生成する酵素量を1 Uとする。

活性測定用反応液組成

1×	IVT Reaction Buffer, HQ
10 mM	ATP・CTP・GTP・UTP
0.9 μg/20 μl	リニア化FLucプラスミドDNA

品質管理データ

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。

注意事項

本酵素の激しい攪拌は行わないでください。
鋳型となる二本鎖DNAや試薬、反応に使用するチューブ、マイクロピペット用チップなどにRNaseが混入した場合、反応後に得られるRNAの収量が低下したり、RNAが断片化します。反応に使用するチューブ、マイクロピペット用チップは専用のものとし、反応を行うときはディスポーザブル手袋を着用して、RNaseが混入しないように注意してください。
均一な長さのRNAを合成するために、T7 promoterを含む線状化したプラスミドあるいはPCR産物などが鋳型DNAとして使用できます。線状化鋳型の3’末端は5’突出あるいは平滑末端が望ましいとされています。
10×IVT Reaction Buffer, HQにはスペルミジンが含まれています。スペルミジンは核酸と複合体を形成して、場合によっては不溶物質として沈殿する可能性がありますので、鋳型DNAは必ず酵素以外のコンポーネントの最後に加えるようにしてください。

使用例（約1.9 kbのRNA合成）

滅菌精製水	X µl
10×IVT Reaction Buffer, HQ	2 µl
ATP、CTP、GTP、UTP	各10 mM
Template DNA	0.5～2 µg
Recombinant RNase Inhibitor, HQ	20 U
Pyrophosphatase (inorganic), HQ	0.1 U
T7 RNA Polymerase, HQ	200 U
Total	20 µl

37℃で1～2時間インキュベーションする。

Pyrophosphatase (inorganic), HQ（製品コード 2451A）を添加した場合のデータはこちら

技術情報

Application

HQ grade酵素で合成したmRNAの収量、および細胞へのmRNAトランスフェクション

使用文献・参考文献

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注意事項

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