組換えタンパク質の可溶化発現に

Chaperone Plasmid Set(シャペロンプラスミドセット)

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 3340 3340 Chaperone Plasmid Set
  • ライセンス
  • バルクなど特別対応可能
1 Kit ¥22,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

大腸菌で異種タンパク質を発現させた場合、発現タンパク質が封入体(inclusion body)を形成したり、プロテアーゼによる分解を受けたりするケースがしばしば見られる。これは、発現タンパク質が正しく折りたたまれないことが原因である場合が多く、タンパク質機能研究の大きな障害となっている。
タンパク質の折りたたみには、それを介助する分子シャペロンの存在が知られており、in vitroでのタンパク質の折り畳みの機序を解明するため、多くの研究がなされている。
本セットに含まれる5種類のプラスミドは株式会社 HSP研究所で開発されたものであり、タンパク質の折りたたみに共同して働いていることが知られている複数の分子シャペロンが、それぞれひとつのプラスミド上にコードされ、シャペロンチームとして効率よく発現するよう設計されている。
これらのシャペロンチームのいずれかと、目的タンパク質を共発現することにより、従来封入体を形成していたタンパク質の可溶性画分への回収効率を高めることができる。

内容

プラスミド濃度液量シャペロンプロモーター インデューサー薬剤マーカー
pG-KJE810 ng/μl 100 μl dnaK-dnaJ-grpE
groES-groEL
araB
Pzt1
L-Arabinose
Tetracyclin
Cm
pGro710 ng/μl 100 μl groES-groEL araB L-ArabinoseCm
pKJE710 ng/μl 100 μl dnaK-dnaJ-grpE araB L-ArabinoseCm
pG-Tf210 ng/μl 100 μl groES-groEL-tig Pzt1 TetracyclinCm
pTf1610 ng/μl 100 μl tig araB L-ArabinoseCm

保存

-20℃

備考

1. 本シャペロンプラスミドはpACYCの複製起点およびクロラムフェニコール耐性遺伝子(Cmr遺伝子)を利用している。汎用されているColEIタイプのアンピシリン耐性遺伝子をマーカーとした大腸菌発現系には共存させて使用できるが、Cmr遺伝子を含むプラスミドや、クロラムフェニコール耐性を示す大腸菌宿主との組み合わせでは利用できない。例えば、pET システムなどで用いられる E. coli BL21(DE3)は宿主として使用できるが、Cmr遺伝子が挿入され、pACYCの複製起点を持つpLysSを保持する E. coli BL21(DE3)pLysSは利用できない。

2. 本製品では、目的タンパク質とシャペロンとの共発現系を構築するため、まずシャペロンプラスミドで形質転換した大腸菌を作製し、その後、目的タンパク質の発現プラスミドで形質転換する2段階の方法を推奨している。
Chaperone Competent Cells BL21シリーズが利用できる。したがって、シャペロンプラスミドで形質転換した大腸菌から、コンピテントセルを調製する必要がある。

DNAのシーケンスデータ

使用上の注意

Chaperone Plasmidおよびその関連製品は、研究目的のみの使用に限定しています。スクリーニングや生産など商用目的での使用にあたっては、別途、弊社との間で商業利用契約の締結が必要です。また、同製品を許可なく改変したり、プラスミド調製のために使用することを禁じます。
製品ご購入に際しては、添付のライセンス同意書に必要事項を記入の上、ご注文の際に弊社販売店までお渡しください。本同意書が添付されていない場合は製品の出荷ができませんのでご注意ください。ライセンスに関するご質問は下記へご連絡ください。
タカラバイオ(株)  営業部 営業企画担当
TEL:077-565-6972  FAX:077-565-6987
ライセンス同意書

Chaperone Plasmid pG-KJE8, pGro7, pKJE7, pTf16にはSalmonella typhimurium由来のaraBプロモーターおよびaraC遺伝子が含まれます。これらのプラスミドで大腸菌を形質転換すると、「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」の遺伝子組換え生物等に該当します。ご使用の際は、「研究開発等に係る遺伝子組換え生物等の第二種使用等に当たって執るべき拡散防止措置を定める省令」(平成16年文科省・環境省令第1号)および組織内の安全委員会の指示に従って行ってください。

コールドショック発現ベクター 製品ガイド

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注意事項
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