製品説明
Recombinant RNase Inhibitor ver.2.0は、porcine liverを由来とするRNase inhibitor組換え体のバージョンアップ製品です。human placentaやporcine liver由来のRNase inhibitorと非常によく似た性質は保持しつつ、不活化の原因となりやすいシステイン残基に変異を導入したことで酸化耐性が向上し、タンパクの安定性が向上しています。
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InhibitorはRNase Aと1:1の複合体を形成し、リボヌクレアーゼ作用に対し阻害活性を示します。しかし、この反応は可逆的であり、尿素あるいはsulfhydryl試薬で複合体を解離させることにより、リボヌクレアーゼ作用は復活し、inhibitorは不可逆的に失活します。また、従来の拮抗性阻害剤(ヌクレオチド類、無機リン酸類)とは異なり、タンパク性であるので、反応系からフェノール処理により容易に除くことが可能です。なお、RNase H活性は阻害しません。
本製品は、RNAの安定性が必要とされる、
in vitro transcription(IVT)やRT-PCRといった様々な反応液中で使用できます。
用途
- in vitro transcription/translation(1 U/μl reaction)
- in vitro transcription/translation with cell-free extract(20 U/μl reaction)
- RT-PCR(0.5 U/μl reaction)
- cDNA synthesis(0.5 U/μl reaction)
- Polysome isolation(1 U/μl reaction)
※ | カッコは各反応液でのRNase inhibitorの使用濃度例 |
内容
Recombinant RNase Inhibitor ver.2.0(40 U/μl) | 5,000 U |
保存
-20℃
濃度
40 U/μl
形状
20 mM | HEPES-KOH, pH7.5 |
50 mM | KCl |
5 mM | DTT |
50% | Glycerol |
起源
E. coli carrying the plasmid containing the gene for ribonuclease inhibitor from porcine liver
一般的性質
質量: | 約52 kDa |
至適pH: | 阻害活性は広いpH域で見られるが、pH7~8で最大 |
活性の定義
5 ngのRNase Aの活性を50%阻害するタンパク量を1 Uとする。
(2’, 3’-cyclic CMPからRNase Aにより生成する3’-CMPを定量)
品質管理データ
注意事項
- 本タンパクの激しい攪拌は行わないでください。
- 活性維持のため、目的の反応を阻害しない濃度でDTTを反応液に含有してください。(例:1 mM)