BspQ I

BspQ Iは、非対称の特定の二本鎖DNA配列を認識し、その外側の一定距離で両鎖を切断するType IIS制限酵素です（Sap IのIsoschizomer^※1でもあります）。mRNA合成のIVT（in vitro transcription）鋳型として使用するPoly(A)含有Plasmid templateに認識配列を組み込むことで、Poly(A)直下に余分な配列が残存しないmRNAデザインが可能となります^※2。                                

※1	Isoschizomer（アイソシゾマー）は同じ塩基配列を認識する起源の異なる制限酵素です。詳細はこちら
※2	Poly(A)直下の余分な付加配列はmRNAのタンパク質への翻訳効率の低下を招くため、IVTでのmRNA合成を目的とする鋳型DNA調製の際にはPoly(A)直下に余剰配列が残らないように設計することが重要です。（使用例を参照ください）。

その他の特徴                                

溶液組成：	酵素および反応用バッファー（添付試薬）のいずれもBSAを含みません。
反応温度：	一般的な制限酵素と異なり、至適反応温度は50℃です。

mRNA合成に用いる鋳型プラスミドの線状化

BspQ I (10 U/μl)	500 U
10✕ BspQ I Buffer	1 ml

－20℃

10 U/μl

Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for BspQ I

BspQ I＊	1 μl
10× BspQ I Buffer	2 μl
基質DNA	≦ 1 μg
Nuclease-free water	up to 20 μl

↓
50℃、1時間インキュベーションする。
＊BspQ Iは最後に添加する。

50℃
注：本酵素の37℃での活性は、50℃での活性の30％程度に低下します。

本酵素の激しい攪拌は行わないでください。

50 μl反応系において、50℃、60分間で10 pmolの蛍光標識probeを切断する酵素量を1 Uとします。

70℃、20分

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。

dam methylation、dcm methylationおよびCpG methylationの影響を受けません。

長時間の反応（例：> 4時間）において、Star活性が見られる場合があります。