特長
- 研究開発から非臨床試験まで目的や用途に合わせたmRNAを作製
- 1～100 mgまで幅広いスケールで作製可能
- 複数の精製方法をご提案可能
- 国内の研究施設で実施
概要
RNA合成関連の試薬開発や製造技術を活かし、目的遺伝子のmRNAを作製します。
mRNA合成
mRNA合成では目的遺伝子を挿入したテンプレートベクターを作製し、in vitro合成システムを用いてDNAの転写（PolyAはプラスミドに含有）およびCapping反応を行います。各工程で必要な精製を実施し、品質試験を実施します。
mRNA合成
mRNA合成では目的遺伝子を挿入したテンプレートベクターを作製し、in vitro合成システムを用いてDNAの転写（PolyAはプラスミドに含有）およびCapping反応を行います。各工程で必要な精製を実施し、品質試験を実施します。
■動画をご覧ください。
サービス内容
研究用mRNA作製
【オプションサービス】
GMP製造はこちら
- 直鎖化プラスミド作製
制限酵素BspQ Iを用いてプラスミドの直鎖化を行います。その他の制限酵素処理も承ります。 - mRNA作製
Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kitを用いてIVT反応を行います。
Vaccinia Capping EnzymeによりRNAの5’末端に7-methylguanylate cap構造を付加し、mRNA Cap2’-O-Methyltransferaseを用いてRNAの1番目のヌクレオチドの2’-O部位を特異的にメチル化します。 - 精製方法
仕様① 塩化リチウム（LiCl）精製
高濃度LiClでRNAを沈殿させます。全RNAを回収するため回収率が高い一方で、目的以外のRNAも含まれます。
仕様② アフィニティクロマトグラフィ
PolyA tailのあるRNAを選択的に回収します。回収率は下がりますが精製度は高くなります。 - 品質試験
RNA濃度／純度試験
ゲル電気泳動（Agilent Bioanalyzer）
【オプションサービス】
- 目的遺伝子のクローニング
目的遺伝子配列をTemplate Vector (BspQ I) for T7 mRNA Synthesisに挿入し、テンプレートベクターを作製いたします。 - キャッピング反応
ご希望に応じてVaccinia Capping Enzyme以外の手法もご相談に応じます。 - 精製方法
使用用途に応じた精製方法をご提案いたします。
（例）疎水クロマトグラフィー ：非臨床実験用途など精製度の高いmRNAの取得のために追加精製いたします。二本鎖RNAの除去が期待されます。 - 品質試験
特性解析：RNA完全長（キャピラリー電気泳動）
残留試験：dsRNA残留試験
その他試験もご相談に応じます。
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価格・納期
ご依頼の内容により異なりますので、お問い合わせください。
納品物
・mRNA溶液
・作業報告書
・作業報告書
ご注文方法
ご依頼の内容により異なりますので、お問い合わせください。
ご留意事項
お客様よりご提供いただいたサンプル・情報および納品物の複製物は、別途期限を定めている場合を除き、業務終了後3ヵ月を経過すると順次廃棄いたします。ご了承ください。
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- 注意事項
- 本受託サービスは、個別に合意した場合を除き、すべて研究目的として作業を行います。納品物を試験研究目的以外へご使用される場合、弊社では納品物に起因する損失・損害等については一切の責任を負いかねます。納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合がありますのでご注意ください。
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