PrimeCap™ T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade

dsRNAの大幅な低減と高いキャッピング効率を実現するT7 RNA Polymerase改変体【GMP grade製品】
  • PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA)(製品コード 2560A)のGMP grade製品
  • GMPに関する各種ガイドライン(ICH Q7、PIC/S GMP)を参照した管理基準に沿って製造管理および品質管理
  • ヒトまたは動物由来原料、およびβ-ラクタム系化合物を不使用
  • in vitro transcription(IVT)でのRNA合成時に、dsRNA生成を大幅に抑制し、生体投与時の免疫原性を低減
  • CleanCap Reagent AGなどのCapアナログと組み合わせることで、効率的なキャッピングと高いRNA収量を実現

製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
T2422S001

TKR

タカラバイオ(株)
PrimeCap™ T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade
NEW ライセンス
200 KU 専用発注書にてお申し込みください。
説明書・データシート・ベクター情報
T2422S001
T2422S010

TKR

タカラバイオ(株)
PrimeCap™ T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade
NEW 取寄 ライセンス
2,000 KU 専用発注書にてお申し込みください。
説明書・データシート・ベクター情報
T2422S010
T2422S100

TKR

タカラバイオ(株)
PrimeCap™ T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade
NEW 取寄 ライセンス
20,000 KU 専用発注書にてお申し込みください。
説明書・データシート・ベクター情報
T2422S100
T2401S010

TKR

タカラバイオ(株)
10X IVT Reaction Buffer GMP grade
NEW 取寄
10 ml 専用発注書にてお申し込みください。
説明書・データシート・ベクター情報
T2401S010
T2401S100

TKR

タカラバイオ(株)
10X IVT Reaction Buffer GMP grade
NEW
100 ml 専用発注書にてお申し込みください。
説明書・データシート・ベクター情報
T2401S100
T2401S500

TKR

タカラバイオ(株)
10X IVT Reaction Buffer GMP grade
NEW 取寄
500 ml 専用発注書にてお申し込みください。
説明書・データシート・ベクター情報
T2401S500
★価格・納期はお問い合わせください
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製品説明

PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP gradeは、Capアナログ依存的RNA合成、低dsRNA生成、および耐熱性(~52℃)の特長を併せ持つ、T7 RNA polymerase*1の改変体です。本酵素とCleanCap Reagent AG(TriLink社)などCapアナログ、10X IVT Reaction Buffer GMP grade(製品コード T2401S010ほか・別売)を使用したin vitro transcription(IVT)では、免疫原性のあるdsRNAの生成を大幅に低減しつつ、高いCap付加効率で高品質なmRNAを大量に調製できます。

*1 T7 promoter配列を含む二本鎖DNAを鋳型、NTPを基質として、プロモーター下流の領域を転写し、in vitroで一本鎖RNAを合成する酵素

反応例
FLuc mRNAでの合成収量およびdsRNA生成の抑制効果(PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA)(製品コード 2560A))詳細はこちら
FLuc mRNA(約1.9 kb)での合成収量(左図)およびdsRNA生成の抑制効果(右図)

用途

  1. Capアナログを使用したcapped mRNAの合成(共転写キャッピング)
  2. 酵素的キャッピングに使用するmRNAの合成
    RNA収量はCapアナログ使用時と比べ、5~30%減少する場合があります。
商用生産用途での利用に際し、供給等に関わる契約を検討されている場合、別途ご相談ください。お問い合わせはこちら

品質

  1. 本製品は、GMPに関する各種ガイドライン(ICH Q7、PIC/S GMP)を参照した管理基準に沿って、製造および品質管理されています。詳細はこちら ? 品質グレードとは?(RUO/HQ/GMP)
  2. 本製品はヒトまたは動物由来原料を含んでおりません。
  3. 本製品はβ-ラクタム系化合物不使用の一次原料を採用しています。

品質保証文書の提供

Certificate of Origin (CoO)、Statement of compliance (SOC)、β-ラクタム系化合物不使用等の証明を発行します。発行のご希望や証明書の種類に関するご要望については、別途ご相談ください。

内容

■酵素
PrimeCap T7 RNA Polymerase GMP grade(製品コード T2422S001) 200 KU

■バッファー
10X IVT Reaction Buffer GMP grade(製品コード T2401S010) 10 ml

本GMP grade製品では、酵素およびバッファーは個別に販売され、酵素・バッファーのセット品はございませんのでご注意ください。

保存

-20℃±5℃

有効期限

CoAおよび製品ラベルをご覧ください。(詳細はお問い合わせください。)

濃度

200 U/μl

起源

Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase variant

一般的性質

質量:約99.8 kDa
補因子:Mg2+

活性の定義

37℃において1時間に0.25 μgの1.9 kb FLuc RNAを生成する酵素量を1 Uとする。

活性測定用反応液組成

1X IVT Reaction Buffer GMP grade
10 mM ATP・CTP・GTP・UTP
0.9 μg/20 μl リニア化 FLuc プラスミド DNA

品質管理データ

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis(CoA)をご覧ください。CoAはこちらからダウンロードできます。

注意事項

  1. 本酵素の激しい攪拌は行わないでください。
  2. RNaseが混入しないように注意してください。RNaseが混入した場合、反応後に得られるRNAの収量が低下したり、RNAが断片化したりする場合があります。
  3. 均一な長さのRNAを合成するために、T7 promoterを含む線状化したプラスミドあるいはPCR産物などが鋳型DNAとして使用できます。線状化鋳型の3’末端は5’突出あるいは平滑末端が望ましいとされています。
  4. 10X IVT Reaction Buffer GMP gradeにはスペルミジンが含まれています。スペルミジンは核酸と複合体を形成して、場合によっては不溶物質として沈殿する可能性がありますので、鋳型DNAは必ず酵素以外のコンポーネントの最後に加えるようにしてください。

使用例(約1.9 kbのRNA合成)

横にスクロールできます
滅菌精製水X μl
10X IVT Reaction Buffer GMP grade2 μl
ATP、CTP、GTP、UTP*1各 10 mM
CleanCap Reagent AG (3’ OMe) *24 mM
Template DNA0.5~2 μg
RNase Inhibitor20 U
Pyrophosphatase (inorganic)0.1 U
PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA) GMP grade200 U
Total20 μl

37℃で1~2時間インキュベーションする。

*1 修飾NTPを使用する場合は、対応するNTPを等量で置き換える。
*2 CleanCap Reagent AG (3’ OMe)(TriLink社 Code. N-7413-1/5/10等)
注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
  • タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
    また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。
  • ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。