高効率、1液タイプのライゲーションキット

DNA Ligation Kit <Mighty Mix>

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 6023 6023 DNA Ligation Kit <Mighty Mix>
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • バルクなど特別対応可能
1 Kit ¥27,000
¥20,250
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

本製品は、T4 DNA Ligaseによるライゲーション反応に必要な試薬をすべて含む1液タイプのライゲーションキットである。反応液組成を至適化し、さまざまなライゲーション反応において高いライゲーション効率を実現している。
  • 操作が簡単な1液タイプ
    Ligation MixをDNA溶液と混合するだけの簡単操作で、あらゆるタイプのライゲーション反応が可能。 反応後、そのまま形質転換やin vitroパッケージングを行うことができる。
  • 平滑末端、TAクローニングにも最適
    粘着末端はもちろん、高い効率を得ることが難しい平滑末端やTAクローニングにおいても、従来品と同等以上の効率が得られる。
    DNA Ligation Kit Ver 2.1(製品コード 6022)との比較
  • 5分間ライゲーションもOK
    簡単なプラスミドベクターへのライゲーションでは25℃、5分での反応も可能。
  • 凍結融解にも強い試薬
    50回の凍結融解でも性能の低下がないことを確認している。

内容

Ligation Mix  150 μl×5

1反応あたり7.5 μlの使用で、100回分に相当する。

保存

-20℃
使用時には氷上で融解 (5~10分) し、ピペッティング等により良く混合すること。
50回の凍結融解では性能に影響がないことを確認している。

反応液量および反応条件


DNA溶液:Ligation Mixの容量比 反応条件
【1】プラスミドベクターへの外来DNAの挿入
  【標準プロトコール】
  【高速プロトコール】
1:1 16℃、30分
25℃、 5分
【2】TベクターへのPCR産物のクローニング 1:1 16℃、30分
【3】直鎖状DNAの分子内ライゲーション
  (self circularization)
1:1 16℃、30分
【4】Linker Ligation, Adaptor Ligation
  プラスミドベクターへのリンカーDNAの挿入
  cDNAへのアダプター/リンカーLigation
1:1
1:2
16℃、30分
【5】λファージベクターへの外来DNAの挿入*
  (in vitroパッケージング)
1:2 26℃、10分

* DNA Ligation Kit Ver.1(製品コード 6021)と同等の効率が得られるが、使用液量からはVer.1の使用がより有利である。

安定性

本製品の凍結融解による効率の変化を、pUC118-Hind III/BAP vectorと564 bp Hind III 断片とのベクターライゲーションで確認した。
50回凍結融解を繰り返しても、効率の低下は見られなかった。

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